Экспрессия и коэкспрессия онкобелков

Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67

Определение экспрессии онкобелка р16 и Ki 67 на поверхности эпителиальных клеток для скрининга рака шейки матки с помощью иммуноцитохимического исследования.

Белок р16; p16 INK4a ; онкопротеин; иммуноцитохимическое исследование.

Синонимы английские

р16 protein; p16 INK4a ; oncoprotein; immunocytochemical study.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок смешанный из цервикального канала и поверхности шейки матки.

Общая информация об исследовании

Рак шейки матки занимает третье место среди всех злокачественных заболеваний у женщин в мире ипервое место в структуре онкологической заболеваемости женщин 15-40 лет в Российской Федерации. К факторам риска развития рака шейки матки относится инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ или HPV) онкогенных серотипов HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35 и другие, а также хронические воспалительные гинекологические заболевания, инфекции, семейный онкологический анамнез, случаи рака шейки матки у родственников, иммунодефициты, курение.

В настоящее время основным методом скрининга рака шейки матки и предраковых состояний является цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала по Папаниколау (мазок по Папаниколау, Рар-тест). Несмотря на общедоступность, надежность и широкое применение, данный метод имеет ряд недостатков: отсутствие стандартных методов взятия биоматериала для исследования, что может привести к ложноотрицательным результатам в 20-30 % случаев, вероятность ложноположительных результатов в 5-70 % случаев, проблемы, связанные с повторным взятием материала. Усовершенствованный метод получения мазков с помощью метода жидкостной цитологии позволяет частично преодолеть недостатки традиционного метода. Кроме того, жидкостная цитология дает возможность выполнять молекулярные виды исследования, одним из которых является иммуноцитохимическое исследование.

Иммуноцитохимический метод – это метод молекулярной иммунологической диагностики, позволяющий идентифицировать клеточные и тканевые молекулы-антигены в результате их связывания с антителами и формирования комплекса «антиген-антитело». Данный метод позволяет проводить иммунологический анализ цитологического материала в условиях сохранения морфологии клеток.

В современной диагностике рака шейки матки иммуноцитохимическое исследование позволяет выявлять белок р16 (p16 INK 4 a ), а точнее его экспрессию на поверхности эпителиальных клеток. Исследованию могут быть подвергнуты отдельные мазки из шеечного канала (эндоцервикса) или с наружной поверхности шейки матки (экзоцервикса) или смешанный мазок, полученный при нанесении на одно предметное стекло биоматериала из эндоцервикса и экзоцервикса.

Белок р16 – это клеточный протеин, участвующий в регуляции клеточного цикла и являющийся ингибитором активности циклинзависимой киназы CDK4/6. В норме киназа неактивна и клеточная пролиферация инактивирована за счет наличия прочной связи фактора транскрипции E2F с белком-супрессором рRb. Белок р16 осуществляет контроль разобщения комплекса E2F-Rb, не допуская пролиферации клетки. В нормально функционирующих клетках синтез р16 сдерживается по механизму обратной связи и, следовательно, концентрация данного белка в нормальной клетке чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией. Онкобелок Е7 ВПЧ с высоким онкогенным риском посредством внутриклеточных механизмов приводит к разобщению комплекса E2F-рRb, активации CDK4/6 киназы, а впоследствии стимулирует чрезмерную клеточную пролиферацию. При этом повышается экспрессия белка р16, что проявляется положительной иммуноцитохимической реакцией мазков клеток.

Читайте также:  Деформирующий остеоартроз

Иммуноцитохимическое исследование онкобелка р16 позволяет достоверно дифференцировать опухолевую и неопухолевую дисплазии, а также обладает высокой диагностической чувствительностью. Известно, что экспрессия данного белка связана со слабовыраженной (CINI), умеренной (CINII) и резковыраженной дисплазией (CINIII) и внутриэпителиальным раком шейки матки. Он практически не обнаруживается в клетках плоского эпителия без признаков дисплазии (0-2 % случаев).

Таким образом, выявление экспрессии белка р16 INK 4 a иммуноцитохимическим методом в дополнение к рутинному методу жидкостной цитологии и окраски мазков по Папаниколау позволяет повысить чувствительность теста, выявлять персистирующую папиллома-вирусную инфекцию до появления морфологических изменений, с наибольшей точностью обнаружить риск развития рака шейки матки, своевременно поставить диагноз и назначить требуемое лечение.

Ki-67 – антиген раковой опухоли, который можно обнаружить в клетке, когда она делится, но в фазе покоя клеточного цикла он не определяется. Эта особенность Ki-67-маркера служит полезным индикатором прогноза поведения злокачественной опухоли. Тест проводится на образце ткани, полученном из опухоли в результате биопсии или оперативным путем. Тест Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях. Но большая доля исследований по определению его значения как маркера опухоли приходится на этот вид рака. Высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.

Для чего используется исследование?

  • Для скрининговой диагностики рака шейки матки и предраковых состояний у женщин;
  • для наблюдения женщин после лечения рака шейки матки, предраковых состояний, цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Когда назначается исследование?

При профилактическом обследовании женщин в возрасте 21-65 лет с интервалом 3 года и в возрасте 30-65 лет с интервалом 5 лет;

при обследовании женщин с высоким риском онкологических заболеваний, наличием рака шейки матки у родственников, с хроническими воспалительными и инфекционными гинекологическими заболеваниями;

при обнаружении положительных результатов на инфицирование ВПЧ онкогенных серотипов;

каждые 6 месяцев первые два года после лечения рака шейки матки или цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Что означают результаты?

Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени тяжести – воспалительные изменения, характерные для инфекции ВПЧ, слабая дисплазия эпителия (CINI).

Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени тяжести – умеренная дисплазия эпителия (CINII).

Тяжелая дисплазия эпителия и внутриэпителиальный рак шейки матки (CINIII).

Отсутствие плоскоклеточных интраэпителиальных поражений, тяжелой дисплазии и плоскоклеточного рака шейки матки – иммуноцитохимическая реакция отрицательная.

  • [12-001] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
  • [09-018] Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • [40-139] Лабораторные маркеры рака шейки матки
  • [12-048] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала — окрашивание по Папаниколау (Рар-тест) (смешанный мазок)
  • [12-050] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала — окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, врач общей практики, онколог, уролог, инфекционист, терапевт.

Читайте также:  Чешется копчик причины и лечение RUSMEDS

Иммуногистохимическое исследование маркера ранней диагностики дисплазии с высокой степенью озлокачествления (скрининг рака шейки матки) p16NK4a + Ki-67

Описание

Иммуногистохимическое исследование маркёра ранней диагностики дисплазии с высокой степенью озлокачествления (скрининг рака шейки матки) p-16NK-4a + Ki-67 — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом для выявления маркёров рака шейки матки в самом начале развития болезни.

ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.

Иммуногистохимическое исследование
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс «антиген-антитело». Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

ИГХ-исследования выполняют для:

  • проведения дифференциальной диагностики злокачественных новообразований;
  • определения гистогенеза опухоли;
  • определения темпа роста и прогноза опухоли;
  • определения возможности применения гормональных препаратов в лечении опухоли;
  • выявления ответа на таргетную терапию.

Рак шейки матки
Рак шейки матки — группа новообразований, растущих из эпителия экзоцервикса и слизистой шеечного канала. Имеет злокачественную природу.

Рак шейки матки встречается у женщин возраста 40-60 лет, однако, в последнее время замечено значительное «омоложение» патологии. Возраст, когда обнаруживаются первые признаки рака, составляет 30–40 лет. В этом возрасте заболевание проявляется агрессивно: оно склонно давать ранние метастазы и рецидивы.

Причинызлокачественной трансформации эпителия шейки матки:

  • ранняя активная половая жизнь;
  • частая смена половых партнеров;
  • применение гормонсодержащих контрацептивных препаратов;
  • инфекции, передающиеся половым путем;
  • носительство вирусов папилломы человека (ВПЧ);
  • частые роды;
  • курение;
  • нарушение гормонального фона, провоцирующее структурные перестройки шейки матки (псевдоэрозия).

В цервикальном канале злокачественные новообразования обнаруживаются реже. Причины патологических изменений — это хроническое воспаление слизистой, образование полипов, нарушения гормонального фона. Новообразования эндоцервикса характерны для женщин старшей возрастной группы.

В большинстве случаев рак шейки матки развивается на фоне дисплазий шейки матки — CIN, которая обусловлена инфицированием вирусом папилломы человека высокоонкогенного типа. Дисплазии никак себя не проявляют или могут маскироваться иными заболеваниями. В большинстве случаев они не сопровождаются симптоматикой и могут быть выявлены случайно.

Прогноз выживаемости и выбор терапии зависит от стадии, на которой болезнь была обнаружена.

Своевременное выявление изменений, предшествующих раковым, позволяет провести радикальное лечение.

Существует закономерность разрастания рака шейки матки и активность белка p-16INK-4a.

p-16INK-4a
В норме протеин p-16ink-4a в клетках эпителия продуцируется в незначительных количествах и при анализе не определяется.

При заражении ВПЧ, вирус встраивается в геном клетки-хозяина и изменяет процессы ее деления и синтеза веществ. В результате клетки эпителия находятся в состоянии постоянной гиперэкспрессии p-16ink-4a. Его обнаружение свидетельствует о неконтролируемой пролиферации эпителиальных клеток и может считаться началом онкологического процесса. Белок p-16INK-4a является достоверным и надежным маркёром оценки риска прогрессирования CIN и развития рака шейки матки. Его определение позволяет выявить и пролечить женщин с предраковой патологией, что снижает заболеваемость.

После проведённого лечения анализ имеет прогностическое значение и определяет вероятность возникновения рецидива.

Читайте также:  Молоко при запоре может ли козье или коровье быть причиной возникновения проблемы

Ki-67
Ki-67 — это маркёр пролиферативной активности опухоли. Он показывает, насколько агрессивен рост опухоли.

  • до 15% — низкая «агрессивность», назначение гормонотерапии;
  • более 30% — высокая «агрессивность» опухоли, показано химиотерапевтическое лечение.

Показания к проведению ИГХ-исследования:

  • наличие подозрительного образования в слизистой шейки матки;
  • наличие в анамнезе болезней, вызванных ВПЧ;
  • высокая степень дисплазии эпителия шейки матки, выявленной в результате рутинной биопсии;
  • выявление прогрессии рака шейки матки.

Подготовка
Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.

При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории, необходимо обязательно предоставить протокол гистологического исследования.

Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в виде описания микропрепарата, применяемых красителей. Он содержит заключение, в котором указано количество белка p16INK4a и индекс белка ki-67. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.

Коэкспрессия онкобелков p16/Ki67

  • Оксидативный стресс
  • HLA-Типирование
  • Аллергология
  • Аутоиммунные Заболевания
  • Биохимия Крови
  • Биохимия Мочи
  • Витамины, Жирные Кислоты
  • Гемостаз
  • Гемотология
  • Генетические Полиморфизмы
  • Гистологические исследования
  • Гормоны
  • Иммунологические Исследования
  • Исследования ДНК
  • Коммерческие Профили
  • Микробиологические Исследования
  • Молекулярная Диагностика
  • Нейромедиаторы: Биогенные амины и их метаболиты
  • Общеклинические Анализы
  • Онкология
  • Пренатальный Скрининг
  • Прочие Анализы
  • Серологические Маркеры
  • Стероидные гормоны и их метаболиты
  • Тяжёлые Металлы
  • Цитология

Рак шейки матки занимает второе место по частоте среди злокачественных новообразований репродуктивной системы у женщин после рака молочной железы. Доказана роль вируса папилломы человека (ВПЧ) в развитии рака шейки матки. Важно вовремя выявить предраковые изменения шейки матки и предотвратить переход их в рак! Каждая женщина после начала половой жизни ежегодно должна проходить обследование у гинеколога, а для выявления предраковых изменений шейки матки 1 раз в 3-5 лет! В последнее время в акушерско-гинекологическую практику для раннего выявления предраковых изменений шейки матки, наряду с определением ВПЧ и цитологических мазков, активно внедряется определение белков р16 и Ki-67. Одновременная секреция их (коэкспрессия) свидетельствует о нарушении регуляции клеточного цикла и об онкологических изменениях эпителия шейки матки, вызванных вирусом папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска.

Условия подготовки определяются лечащим врачом. Соскоб из урогенитального тракта (у женщин: цервикальный канал): Мазки не следует брать: во время менструации; ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов; после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания; ранее 24-48 часов после полового контакта.

11 рабочих дней

Мы работаем с крупнейшими лабораторными комплексами России:

  • — Центр молекулярной диагностики CMD (Лаборатория ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзор)
  • — Клинико-диагностические лаборатории KDL
  • — Лаборатория ДНКОМ — научный центр молекулярно-генетических исследований (НЦМГИ)
  • — Лаборатория микробной хроматографии Медбазис
  • — Лаборатория новейших молекулярно-генетических исследований Медикал Геномикс
  • — Независимая лаборатория ИНВИТРО

— Цена указана без учета стоимости взятия биоматериала. При единовременном заказе нескольких услуг, услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.

— Запись заранее не требуется, если у Вас остались какие-либо вопросы воспользуйтесь функцией «Обратный звонок», и мы Вам перезвоним

Лек Диагностик
С любовью, заботой и вниманием к Вашему Здоровью

Ссылка на основную публикацию
Экзистенциальная психология-важное направление в современной науке 1
Экзистенциальная психология Экзистенциальная психология возникла как последовательный, целостный подход к пониманию человеческого поведения и к влиянию на него. Несмотря на...
Щадящая гинекология вместо удаления матки врачи предлагают новые методы лечения — МК
Причины и характер выделений после удаления матки Удаление матки (гистерэктомия) – это необходимая операция для женщин, имеющих ряд опасных гинекологических...
Щадящая диета что это такое, меню в домашних условиях на каждый день и неделю для похудения женщин,
Рацион на неделю: диета «Стол № 5» Диета «Стол № 5» — это лечебный план питания, который входит в комплекс...
Экзодерил — 20 отзывов, инструкция по применению
Экзодерил Рейтинг 4,0 / 5 Эффективность Цена/качество Побочные эффекты Экзодерил (Exoderil): 9 отзывов врачей, 11 отзывов пациентов, инструкция по применению,...
Adblock detector